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CGT既細胞與基因治療是利用基因治療載體將外源的治療性基因轉導至細胞，再通過外源基因的轉錄和翻譯，改變細胞原有基因表達以治療疾病的方法。細胞基因治療是繼小分子、大分子靶向療法之后的新一代精準療法，在生物醫藥領域尤其是癌癥及遺傳病治療領域極具發展前景。

截止至2023年8月，FDA批準的CGT產品已有32種。國家藥監局已批準100余個細胞和基因治療產品開展臨床試驗。但是CGT作為新一代生物技術革命產物，一個痛點是生產成本非常高，相應而生的降低CGT相關終端產品的成本也是讓CGT更好造福人類的關鍵。Polyplus致力于為客戶提供從原料質粒、轉染試劑、人力成本、儀器設備等多層面降低成本的高性價比轉染試劑。

大規模病毒生產的金標準

Polyplus——PEIpro?

PEIpro?特點

l  兼容多種細胞培養系統和商業化培養基；

l  DNA用量更少，經濟高效大批量生產病毒載體；

l  三個質量等級的產品適合各個階段的應用需求，擁有完全GMP等級的產品；

l  基于PEI優化的轉染試劑，適合貼壁和懸浮系統的LV、AAV、RV等多種病毒大規模生產。

1、適用于多種細胞培養系統

無論基于細胞培養的系統和生產規模如何，對于慢病毒和AAV, PEIpro?和PEIpro?-HQ的有效病毒載體產量分別優于10⁷IG/mL和10⁹vg /mL。

2、低量DNA生產高量病毒

與另一種基于PEI的試劑和磷酸鈣轉染相比，PEIpro?用更少的試劑和更低的DNA量產生更多的病毒。將HEK-293懸浮細胞以1 × 10⁶/ml的濃度接種于無血清培養基中，按照推薦方案用PEIpro?、和另一種基于PEI的試劑轉染。AAV-2使用無輔助包裝系統生產，轉染72h使用GFP報告基因表達測量病毒滴度。右圖：在無血清培養基中生長的貼壁HEK-293細胞中產慢病毒，每75cm2燒瓶用15ugDNA和30ul PEIpro?，轉染48h后通過滴定上清液測定病毒產量。

3、更少的試劑用量

與其他PEI相比，PEIpro?所需試劑較少，DNA用量也較低。將HEK-293懸浮細胞以1 × 10⁶/ml的濃度接種于無血清培養基中，用PEIpro?、PEI MAX?和L-PEI 25 kDa轉染。轉染48 h后用常規熒光素酶法檢測熒光素酶的表達。

懸浮培養體系中用于生產rAAV的新一代轉染試劑

Polyplus——FectoVIR?-AAV

FectoVIR?-AAV特點

l  有GMP級別產品；

l  合成型，不含任何動物源成分；

l  在懸浮細胞體系中達到驚人的病毒產量；

l  適合大規模生產，轉染復合物工作體積小、更穩定；

l  DNA用量更少，1 L FectoVIR ? -AAV 轉染試劑足以轉染 500 L 細胞培養物。

應用數據

1、極高的病毒產量

?上圖：對比其他產品，FectoVIR?-AAV可提高10倍病毒產量

下圖：FectoVIR?-AAV通過高生產率大大降低制造成本。對在2000L STR中生產10E18的AAV進行成本建模，基于

DSP后3O% AAV回收率，使用FectoVIR?-AAV生產10E18的AAV需要4個生物反應器，使用PElpro ?需要7個生物反應器，使用其他PEI需要22個生物反應器。

2、更少的DNA用量

FectoVIR?-AAV在提高產量的同時可使DNA用量減少25%(+33% vs PEIpro?)

3、適合大規模生產

左圖：復合物工作體積：由10%減至1%。右圖：復合物穩定性: 可延長至6小時

4、兼容多種商業化細胞培養基

使用在幾種合成培養基中制每的FectoVIR?-AAV/DNA復合物轉染懸浮HEK-293T胞后72小時，收獲重組AAV-2。

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